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C18液相柱及保護(hù)柱:高效液相色譜的關(guān)鍵組件

  • 發(fā)表時間2024-09-13
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  在現(xiàn)代化學(xué)分析領(lǐng)域,高效液相色譜(HPLC)技術(shù)憑借其高分離效率、高靈敏度和準(zhǔn)確性,成為了重要的分析手段。而在HPLC系統(tǒng)中,C18液相柱及保護(hù)柱扮演著至關(guān)重要的角色。
  C18液相柱,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,具有較高的碳含量和出色的疏水性。這使得它對各種類型的生物大分子有著強(qiáng)大的適應(yīng)能力,適用范圍廣泛,是高效液相色譜儀分析中極為重要的色譜柱類型。
  在使用C18液相柱時,有許多需要注意的要點(diǎn)。新的C18色譜柱在使用前,必須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗,這樣能使固定相充分潤濕、碳鏈?zhǔn)嬲?,讓色譜柱的性能達(dá)到最佳狀態(tài)。而在液相色譜儀檢測分析樣品完畢后,也需要沖洗色譜柱。特別是當(dāng)流動相中含有酸或鹽時,必須將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈,通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積。
  如果色譜柱長期閑置,要將其沖洗,并保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液中,比如90%甲醇水。同時,由于C18柱的固定相疏水性較強(qiáng),使用過程中應(yīng)盡量避免高水相條件,建議水相比例不超過90%,否則易引起固定相疏水塌陷,導(dǎo)致柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負(fù)面影響。
  當(dāng)色譜柱出現(xiàn)壓力升高、柱性能下降的情況,通常是因?yàn)樯V柱被污染,對其進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效。而色譜柱壓力驟升,可能是鹽析出或篩板堵塞引起。若是鹽析出,用10%甲醇水低流速沖洗至壓力恢復(fù)即可;若不是鹽析出,以純甲醇或10%甲醇水為流動相反沖色譜柱,若反沖半小時仍無效果則需尋找其他原因。
  為了延長C18液相柱的使用壽命,保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性,保護(hù)柱的使用是不可少的。在HPLC系統(tǒng)中,不能保證所注射樣品能夠洗脫,尤其是中藥及血液樣品,每次進(jìn)樣總會有一部分殘留在柱頭,久而久之就會使柱頭失效。而保護(hù)柱能夠有效地解決這一問題。
  這種新型的保護(hù)柱組件結(jié)合了不銹鋼的強(qiáng)度和PEEK預(yù)填柱芯的方便和高效。無需使用工具,將一小段與柱填料相同的保護(hù)柱置入進(jìn)樣閥和色譜柱之間,就能延長色譜柱的壽命,保證重現(xiàn)性結(jié)果。

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